人工氣候室比較3種青枯菌接種方法效果
來源： http://m.6upk.com 類別：實用技術 更新時間：2014-12-08 閱讀次
【本資訊由中國糧油儀器網(wǎng)提供】 鑒定高致病力的青枯菌菌株并采用簡便、高效、適用于田間大規(guī)模篩選的抗病性鑒定方法就成為抗病育種的關鍵。試驗對青枯菌菌株進行了生化型鑒定,于人工氣候室比較了3種不同的青枯菌接種方法,得出高致病力的菌株和較好的抗病性鑒定方法,為番茄青枯病育種提供指導。
試驗在人工氣候室進行,材料為5~6片真葉的生長期為35d的番茄幼苗，智能人工氣候室的溫度為28℃,相對濕度為80%。病組織采集自田間新發(fā)病的病癥嚴重的植株,用剪刀剪取發(fā)病中心部位約10cm長的莖段。先用蒸餾水沖洗干凈,再用75%的酒精表面消毒。用滅菌的小刀或剪刀將其剪成每段3~4cm,然后均放入盛有200mL滅菌水的燒杯中浸泡1~2h。
從病組織橫斷面向水中流出白絲狀的病原菌,確認懸浮液變混濁后,輕輕搖晃使其上下均勻,然后吸入到2mL的離心管中再用接種環(huán)沾取菌原液在TTC培養(yǎng)基上畫蛇線,放入人工氣候室培養(yǎng)室中30℃培養(yǎng)2d,觀察并挑選典型的單菌落(以下簡稱Rs)。形態(tài)學觀察典型的強致病力菌落呈不規(guī)則圓形略突起,乳白色中心淡粉紅色,周圍白邊較寬,具流動性。
觀察人工氣候室培養(yǎng)2d、7d、14d之后,看到培養(yǎng)基表面的顏色均由橄欖綠色變?yōu)槌壬?據(jù)此表明:智能人工氣候室試驗分離出的青枯菌菌株RS-42對6種不同的碳源均呈陽性反應,由此確定病原菌菌株為生化型。曾番茄試驗場的新鮮青枯病發(fā)病植株通過人工氣候室進行了病原菌的分離培養(yǎng),用經(jīng)典的傷根灌注法進行了人工接種試驗,在接種后1個月的時間內,只有氣生根出現(xiàn),沒有典型的青枯病葉片萎蔫病癥發(fā)生�！ �
試驗在人工氣候室進行,材料為5~6片真葉的生長期為35d的番茄幼苗，智能人工氣候室的溫度為28℃,相對濕度為80%。病組織采集自田間新發(fā)病的病癥嚴重的植株,用剪刀剪取發(fā)病中心部位約10cm長的莖段。先用蒸餾水沖洗干凈,再用75%的酒精表面消毒。用滅菌的小刀或剪刀將其剪成每段3~4cm,然后均放入盛有200mL滅菌水的燒杯中浸泡1~2h。
從病組織橫斷面向水中流出白絲狀的病原菌,確認懸浮液變混濁后,輕輕搖晃使其上下均勻,然后吸入到2mL的離心管中再用接種環(huán)沾取菌原液在TTC培養(yǎng)基上畫蛇線,放入人工氣候室培養(yǎng)室中30℃培養(yǎng)2d,觀察并挑選典型的單菌落(以下簡稱Rs)。形態(tài)學觀察典型的強致病力菌落呈不規(guī)則圓形略突起,乳白色中心淡粉紅色,周圍白邊較寬,具流動性。
觀察人工氣候室培養(yǎng)2d、7d、14d之后,看到培養(yǎng)基表面的顏色均由橄欖綠色變?yōu)槌壬?據(jù)此表明:智能人工氣候室試驗分離出的青枯菌菌株RS-42對6種不同的碳源均呈陽性反應,由此確定病原菌菌株為生化型。曾番茄試驗場的新鮮青枯病發(fā)病植株通過人工氣候室進行了病原菌的分離培養(yǎng),用經(jīng)典的傷根灌注法進行了人工接種試驗,在接種后1個月的時間內,只有氣生根出現(xiàn),沒有典型的青枯病葉片萎蔫病癥發(fā)生�！ �
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